Divorcé d'Erica, Larry Daley est incapable de garder un travail. Craignant que son fils Nick le prenne pour un éternel perdant, ce rêveur au grand cœur se jette sur la seule perspective qui s'offre à lui : le poste de gardien au Muséum d'histoire naturelle de New York. Larry constate bientôt que, chaque nuit, les personnages en cire et les animaux empaillés prennent vie ! Il est vite débordé par la pagaille.
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